解决方案。我们突破高精设备局限，开发手工定制化仪器及配件，通过科研巧思将基础工具转化为创新实验方案。产品涵盖行为学装置、操作辅助工具等，使实验室在保持操作简效的同时，实现精细化数据采集，助力科研人员以创造性思维发掘简易仪器的潜在科研价值。
为探究LHPV­LHb神经环路在生理、病理状态下的作用，采用光遗传技术实现特异性激活或抑制该神经环路，来检测小鼠在感觉异常与情绪障碍中的作用。首先将PV­Cre转基因小鼠随机分为三组，分别在双侧LH注射rAAV2/9­EF1α­DIO­ChR2­mCherry、rAAV2/9­EF1α­DIO­NpHR­mCherry和rAAV2/9­EF1α­DIO­mCherry病毒。步骤如下：
1）将PV-Cre小鼠用1%戊巴比妥钠腹腔麻醉（10mg/kg），等小鼠进入深麻醉状态后将头部毛发剃干净，将其头部固定在小鼠适配器上，操作过程中保证左右耳杆对称，将眼睛用红霉素软膏遮住，防止无影灯照伤小鼠眼球。
2）用酒精擦拭头皮消毒，用消过毒的手术剪沿头部正中央剪开一小口，将剪开后的头皮分为两半，露出前囟点和后囟点，用沾有生理盐水的棉花团将小鼠颅骨表面软组织及血渍擦拭干净，用四点调平法将颅骨平面调为水平状态。根据小鼠脑图谱确定好双侧LH所在位置，用颅钻在其上方钻孔。
Bregma点归零，然后移至左侧LH内，坐标（AP:﹣1.10mm，LR：﹢1.03mm，DV：﹣5.30mm）,右侧LHb（AP:﹣1.10mm，LR：﹢1.03mm，DV：﹣5.30mm）注射250nL病毒，速度为20nL/min，病毒注射完，留针8min左右。定位注射结束后，缝合颅顶皮肤并消毒，将小鼠单独放回恒温箱内待苏醒后放回原笼饲养。注射病毒表达1m后进行行为学检测。
4）在病毒注射3w后，进行双侧光纤埋置。将上次注射完光遗传病毒的PV-Cre小鼠用1%戊巴比妥钠腹腔麻醉（10mg/kg），等小鼠进入深麻醉状态后，将其头部固定在小鼠适配器上，操作过程中保证左右耳杆对称，将眼睛用红霉素软膏遮住，防止无影灯照伤小鼠眼球。
5）用酒精擦拭头皮消毒，用消过毒的手术剪将小鼠颅顶皮肤剪掉，完全暴露出插光纤所需面积，用棉签将小鼠颅骨表面软组织及血渍擦拭干净，用四点调平法将颅骨平面调为水平状态。根据小鼠脑图谱坐标，事先计算好倾斜10°后双侧LHb的位置，用颅骨钻在其上方打孔，清理颅骨粉末与血液，确保颅骨表面干净清爽，无液体及软组织残留。
6）用光纤夹持器固定好定制光纤，旋转双侧机械臂各10°后其尖端移至Bregma点归零，然后移动至LHb左右两侧位点（AP:-1.60mm，LR：±0.95mm，DV：-2.43mm）斜上方后缓缓下降至所需深度。确保脑组织不再有血液渗出后用牙科水泥将光纤的陶瓷尾座粘在在颅骨表面，在此过程中尽量避免牙科水泥粘到小鼠头皮双侧皮肤组织，待牙科水泥完全凝固后，松开固定光纤的螺丝，卸下光纤夹持器，用红霉素软膏进行局部消毒。将小鼠单独放回恒温箱内待苏醒后放回原笼饲养，小鼠术后恢复1w即可进行行为学检测。
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光遗传调控参数，蓝光激光器（波长为460nm），蓝光刺激频率为40Hz，脉宽为2ms，光纤末端光照强度为5mW；黄光激光器（波长为589nm），光照强度为5mW的直流光。以下为OFT、EPM、TST检测必需步骤：
1）实验测试前1w实验者可每天亲抚小鼠几分钟以减轻应激反应。实验前1h将小鼠放于待测行为室适应，适应前连接好激光器、光纤滑环和光纤跳线；调节好光照参数、房屋光照强度、录像设备等。
2）行为视频正式录制开始前将小鼠用异氟烷气体麻醉，将光纤跳线与其头部陶瓷光纤连接，放回原鼠笼待其恢复并适应5min左右开始正式试验。
实时位置厌恶实验是在一个三箱设备中进行，设备是由两个大小相同的箱体和中间连接通道组成。将小鼠放进无光刺激一侧箱体，每当小鼠穿过中间通道到达对侧箱体时给予40Hz激光刺激，直到小鼠离开刺激一侧箱体到达中间通道时停止给光。试验持续20min，保持测试一直处于安静环境。在两次测试之间，用75%酒精彻底清洁箱体内壁及底部，以去除上只小鼠残留气味，待酒精完全挥发后，测试下一只小鼠。实验测试完毕后，使用软件进行视频分析，主要测量参数为小鼠在无光刺激箱体、光刺激箱体和中间通道活动的时间。
检测了在生理状态下激活或抑制LHPV­LHb神经环路对小鼠厌恶、焦虑及抑郁样行为的影响。实时位置厌恶实验结果显示，与对照组（Ctrl）相比，蓝光激活ChR2组小鼠在光刺激一侧箱体活动时间显著降低，而在中间通道活动时间无明显变化。
A：光遗传激活LHPV-LHb神经环路，Ctrl组和ChR2组小鼠在实时位置厌恶实验中活动轨迹图；B和C：在实时位置厌恶实验中光刺激一侧箱体停留时间和时间百分比；
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